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微生物实验室操作辅导 微生物实验室操作辅导书目录 （一）安全守则 （二）查验总则 （三）根本技能要求 （四）食物平板菌落计数 （五）食物中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌查验办法 （六）沙门氏菌查验 （七）金黄色葡萄球菌查验 （八）霉菌计数 （九）革兰氏染色 （十）空气中微生物的查验 （十一） 水中微生物的查验 （十二）食物触摸面的微生物查验 （十三）蔬菜农残的快速检测 1 微生物实验室操作辅导书（受控） 审阅： 编制： （一）安全守则 1 进入实验室作业衣、帽、鞋有必要穿戴整齐。 2 在进行高压、枯燥、消毒等作业时，作业人员不得私行脱离现场，仔细查询温 度、时刻，蒸馏易挥发、易燃液体时，禁绝直接加热，应置水浴锅上进行。 3 严禁用口直接汲取药品和菌液，按无菌操作进行，如产生菌液、病原体溅起容 器外时，应立即用有用消毒剂进行完全消毒，安全处理后方能脱离现场。 4 作业完毕，两手用清水番笕洗净，必要时可用（杀菌剂）新洁尔灭、过氧乙酸 液浸泡手，然后用水冲刷，作业服应常常清洗，坚持整齐，必要时高压消毒。 5 实验完毕，及时整理现场和实验用具，对染菌带毒物品，进行消毒灭菌处理， 并填写日常作业记载。 6 每日下班，仔细查看水、相关电源是否封闭和正在运用的设备工作是否正常， 并仔细记载。 下班前关好门窗，方可离去。 01 －09－ 2006 2 微生物实验室操作辅导书（受控） 1 修订． （二）查验总则 1 主题内容与适用范围 本文规矩了微生物查验一般规矩。 本文适用于食物中微生物学查验的采样、查验及成果陈述。 2 样品的收集 2.1 采样意图 确保收集的样品能代表悉数被查验的物质，使查验剖析更具代表性。 2.2 采样准则 2.2.1 收集的样品要有代表性，采样时应首要对该批食物质料、加工、运送、 储藏办法条件、周围环境卫生情况等进行具体查询，查看是否有污染源存在，同 时能反映悉数被检食物的组成、质量和卫生情况。 2.2.2 应设法坚持样品原有微生物情况，在进行查验前不得污染，不产生改变。 2.2.3 采样有必要遵从无菌操作程，容器有必要灭菌，防止环境中微生物污染，容 器不得运用煤酚皂溶液，新洁尔灭、酒精等消毒物灭菌，更不能含有此类消毒药 物，以防止杀掉样品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需灭菌方可运用。 2.3 采样数量 取样数量的确认，应考虑剖析项意图要求、剖析办法的要求及被检物的均匀程度 三个要素。样品应一式三份，别离供查验、复检及备检运用，每份样品数量一般 不少于 200g。 依据不同品种采样数量略有不同，实验室查验样品一般为 25 克。 2.4 采样办法 01 －09－ 2006 1 修订． 3 微生物实验室操作辅导书（受控）2.4.1 采纳随机抽样的办法。 2.4.2 直接食用的小包装食物，尽可能取原包装，直到查验前不要开封，以防 污染。 2.4.3 如为非冷藏易腐食物，应敏捷将所采样品冷却至 0－4℃。 2.4.4 不要使样品过度湿润，以防食物中固有的细菌增殖。 2.4.5 在将冷冻食物送到实验室前，要始终坚持样品处于冷冻状况。样品一旦 消融，不行使其再冻，坚持冷却即可。 2.5 样品的保存和运送 2.5.1 样品收集完后，应敏捷送往实验室查验，送检进程中一般不超越 3h，如 旅程较远，可保存在 1－5℃环境中，如需冷冻者，则在冷冻状况下送检。 2.5.2 冷冻样品应寄存在－15℃以下冰箱内；冷却和易腐食物应寄存在 0－5℃ 冰箱或冷却库内；其它食物可放在常温冷暗处。 2.5.3 运送冷冻和易腐食物应在包装容器内加适量的冷却剂或冷冻剂。确保途 中样品不升温或不消融。 2.5.4 待检样品寄存时刻一般不该超越 36 小时。 3 查验样品的制备 3.1 样品的悉数制备进程均应遵从无菌操作程序。 3.2 查验冷冻样品前应先使其消融。可在 0－4℃消融，时刻不超越 18 小时， 也可在温度不超越 45℃的环境中消融，时刻不超越 15 分钟。 3.3 查验液体或半固体样品前应先将其充沛摇匀。如容器已装满，可敏捷翻转 25 次；如未装满，可于 7s 内以 30cm 的起伏摇摆 25 次。从混样到查验间隔时刻 不该超越 3 分钟。 3.4 敞开样品包装前，先将外表擦洁净，然后用 75％乙醇消毒敞开部位及其周 围。 3.5 非粘性液体样品可用吸管汲取一定量，然后参加适量的稀释液或培养基内， 吸管刺进样品内的深度不该超越 2.5cm,也不得将吸有样品的吸管浸入稀释液或 培养基内。 3.6 粘性液体样品可用灭菌容器称取一定量，然后参加适量的稀释液或培养基。 01 －09－ 2006 1 修订． 4 微生物实验室操作辅导书（受控）3.7 固体或半固体样品可用灭菌的均质杯称取一 定量，再加适量的稀释液或培养基进行均质，从样品的均质到稀释和接种，相隔 时刻不该超越 15 分钟。 4 查验 4.1 实验室收到样品后，首要进行外观查验，及时依照国家标准查验办法进行 查验，查验进程中要仔细、担任，严厉进行无菌操作，防止环境中微生物污染。 4.2 查验所运用的稀释液、试剂、培养基触摸的全部器皿有必要通过有用的灭菌。 4.3 实验室所用仪器、设备的功能应定时查看和校对。 4.4 制备试剂和培养基所用的水，应为无离子水或用玻璃器皿蒸馏的蒸馏水。 4.5 查验完毕后，一切带菌的培养基、试剂、稀释液和器皿有必要赶快灭菌和洗 刷。清洗过的器皿不该残留洗涤剂的痕迹。 5 查验记载和成果的陈述 5.1 经查验的每份样品都应有完好的查验记载。样品查验进程中所用办法、出 现的现象和成果等均要用文字写出实验记载，以作为对成果剖析、断定的依据， 记载要求具体、清楚、实在、客观、不得涂抹和假造。 5.2 查验完毕后，依据查验成果，及时填写查验陈述书，签字并经担任人审阅 签字后宣布。 01 －09－ 2006 5 微生物实验室操作辅导书（